立克次体、伤寒/副伤寒沙门菌、布鲁氏菌免疫检测的临床意义

1、立克次体

立克次体是一类微小的杆状或球杆状微生物，大小为(0.3~0.5)μm×(1.0~2.0)μm，革兰染色阴性，除极少数外，均专性寄生在宿主细胞内。1909年美国青年医生Howard Taylor Ricketts首次观察到这种病原体，为纪念他在研究斑疹伤寒时不幸感染而献身，他所发现的病原体被命名为立克次体属。立克次体含有DNA和RNA两种核酸，以二分裂方式繁殖，以节肢动物为传播媒介或为储存宿主，大多是人畜共患的病原体。对人类致病的立克次体主要包括3个属，即立克次体属、东方体属以及无形体科的埃立克次体属。立克次体病呈世界性或地方性流行，人类多因节肢动物吸血时而受到感染。我国发现的立克次体病主要有斑疹伤寒和恙虫病等。致病性立克次体感染人体后，大多会出现头痛不适、发热、出疹等共同症状。立克次体的血清学检测方法主要有外-斐反应和免疫荧光法等。大部分立克次体与普通变形杆菌某些X菌株的菌体耐热多糖抗原有共同的抗原性，故可用这些X菌株代替立克次体抗原进行非特异性凝集反应去检测抗体，这种交叉凝集试验被称为外-斐试验，可用于立克次体病的辅助诊断。立克次体病患者OX凝集素一般上升较晚，可早在病程5~6天产生，但经常为2周左右方出现阳性，在退热前后达到最高效价，以后很快下降。病程中双份或多份血清试验，滴定效价在1:160以上者为阳性反应，若效价有4倍增长，则有诊断意义。往往有些病例在整个疾病过程中效价不见上升，如复发性斑疹伤寒及约15%的经疫苗接种后感染斑疹伤寒的病例。有些轻症斑疹伤寒或某些发病严重者其他血清学试验呈阳性反应，但其外-斐反应可为阴性。斑点热患者外-斐反应效价通常为OX19高于OX2，但也有OX2较高者。若仅出现OX2阳性，则对诊断斑点热有特殊意义。我国常见的立克次体病主要为斑疹伤寒和恙虫病，流行性斑疹伤寒主要为OX19凝集效价升高，恙虫病主要表现为OXk明显升高。外-斐反应的假阳性反应可发生在变形杆菌尿路感染、伤寒、钩端螺旋体病、回归热、疟疾及各种病因引起的严重肝病的患者血清检查，孕妇也往往呈假阳性反应。因此，对外-斐反应结果应结合流行病学和临床症状作慎重分析和判断。免疫荧光法为现在诊断立克次体病常用的方法。单份血清效价>1:64或双份血清效价呈4倍增长或有IgM抗体出现即初步诊断为立克次体感染，但本法不能区分患者感染的立克次体的类型。特异性抗立克次体的IgM抗体的出现提示新近感染。

2、伤寒、副伤寒沙门菌

伤寒、副伤寒是由伤寒沙门菌、副伤寒甲、乙、丙沙门菌引起的急性肠道传染病。目前，国内外仍有该疾病的流行和散在发生。病原菌的分离是诊断该疾病的金标准，血清学检测简便、快速，能辅助诊断疾病。沙门菌抗原结构主要包括菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原及表面抗原(Vi抗原等)。O抗原刺激机体产生的抗体以IgM为主，H抗原刺激机体产生的抗体以IgG为主。根据已知沙门菌的O、H抗原，可检测血清中有无相应的抗体。伤寒(副伤寒)通常在发病后1周左右出现抗体，第3~4周的阳性率可达70%以上，效价亦较高，并可维持数月。有少数患者抗体阳性较迟才出现，或者抗体效价水平较低。约有10%~30%患者肥达反应始终为阴性。

解释肥达反应结果时应注意：①抗体O高H不高：可能为疾病的早期；沙门菌属中其他菌种感染引起的交叉反应；或H-O变异的沙门菌引起的感染等。建议一周后复查，如一周后H也升高可证实为感染。②H高O不高：可能为疾病的晚期；以往患过伤寒、副伤寒或接受过预防接种。③某些疾病如急性血吸虫病、败血症、结核病、风湿病、溃疡性结肠炎等，可出现假阳性反应。胶体金试纸条检测的结果解释：①仅IgM阳性表示伤寒(副伤寒)急性期；②IgM与IgG同时阳性表示疾病的急性中期；③仅IgG阳性表示可能疾病复发、重新感染、曾经感染或接受过预防接种；④IgM与IgG同时阴性表示可能未感染伤寒(副伤寒)。伤寒(副伤寒)抗体检测结果不能作为确诊疾病的唯一依据，需结合临床症状综合分析。

3、布鲁氏菌

布鲁菌病，简称布病，又称地中海热、波状热或马尔他热，由布鲁菌属引起，是世界上最常见的人兽共患传染病之一。目前布鲁菌属公认分为6个种，使人致病的有羊种、牛种、猪种和犬种。疫畜是布病的主要传染源，在我国(主要是在牧区)流行占绝对优势的为羊布鲁菌，其次为牛和猪布鲁菌。对布鲁菌病诊断应该是综合性的，必须结合患者的流行病学接触史、临床表现和实验室检查结果。凝集反应试验对急性期感染的诊断相对较好，病程中效价递增4倍及以上意义更大，对慢性期、复发或局灶性感染的诊断具有较高的假阴性率。同时正常人可有低滴度的凝集素，接种布鲁菌活菌苗者凝集效价也增高。不完全抗体可阻断完全抗体与抗原的凝集反应使凝集试验呈假阴性，但抗人免疫球蛋白试验可阳性；抗人免疫球蛋白试验可适用于慢性期、复发或局灶性布鲁菌感染。凝集反应不能区分免疫球蛋白的类型(IgM、IgG和IgA)，如果需要区分，可选择针对性的ELISA或者免疫荧光法。ELISA法简单快速、易于自动化和检测大量标本，敏感性和特异性均能达到95%，并可用于检测总或具体某一类免疫球蛋白(IgM、IgG或IgA)。另外，尽管血清学试验是目前诊断布鲁菌病的常用方法，但其存在一些局限性，如缺少标准的抗原质控品；某些患者血清中(不管是在治疗中还是治愈后)布鲁菌抗体始终保持较高的滴度。